Was ist die schnelle selektive Atp-Biolumineszenz?
Die schnelle selektive Atp-Biolumineszenz analysiert das ATP der Zielmikroorganismen spezifisch, ohne das ATP anderer nicht zielgerichteter Zellen. Dieser selektive schnelle Atp-Biolumineszenz-Test braucht keine Inkubation mit Wachstumsmedien und keine physische Trennung nach Zellgröße durch Fltration oder Zentrifugation.
Bei der schnellen selektiven Atp-Biolumineszenz wird eine selektive Reagenzienchemie verwendet, um durch Biolumineszenz innerhalb von Minuten oder Stunden gezielte Mikroorganismen von nicht gezielten Mikroorganismen in einer Probe nachzuweisen, die sowohl gezielte als auch nicht gezielte Mikroorganismen enthält.
Was Schnelle Selektive Atp-Biolumineszenz NIE IST
Die schnelle selektive Atp-Biolumineszenz erfordert keine physikalische Trennung wie Filtration oder Zentrifugation. Filtration und Zentrifugation können viele Mikroorganismen nicht effizient voneinander trennen. Diese Trenntechniken führen zu trügerischen Ergebnissen, wenn man versucht, Mikroorganismen nach ihrer Größe zu unterscheiden.
Wir wollen sehen, warum zum Beispiel Hefen durch Filtration oder Zentrifugation so schwer von Milchsäurebakterien zu unterscheiden sind.
Außerdem erfordert die schnelle selektive Atp-Biolumineszenz kein vorheriges Medienwachstum vor der Atp-Biolumineszenz, um selektiv zu sein. Siehe unten warum ist die Inkubation mit selektivem Wachstumsmedium + Atp-Biolumineszenz keine schnelle Lösung für die Unterscheidung von Hefen und Bakterien?
Hefen können nicht leicht von Milchsäurebakterien getrennt werden.
Warum sich Hefen nicht leicht von Milchsäurebakterien in einer Lebensmittel-/Getränkeprobe trennen lassen.
Wie hier auf dem linken Bild zu sehen ist, binden sich Milchsäurebakterien sehr häufig an Hefezellen.
Hefen lassen sich nicht leicht von allen Essig- und Milchsäurebakterien trennen. Denn einige Bakterienzellen haften an Hefezellen und bilden mikrobielle Cluster.
Aus diesem Grund ist eine physische Trennung von Hefen und Milchsäurebakterien durch Filtration oder Zentrifugation in einer realen Getränkematrix weder machbar noch realistisch.
Es mag funktionieren, wenn Sie Ihre eigene Labormischung aus Hefe und Milchsäurebakterien unter kontrollierten Bedingungen herstellen und in eine Getränkematrix mischen, aber in der realen Situation der Getränkeprobenverarbeitung wird dies nicht funktionieren.
Außerdem ist die künstliche Aussaat von Milchsäurebakterien oder Hefen, die nicht zur gleichen Lebensmittel-Getränke-Matrix gehören, mit Stress verbunden und kann bei bestimmten Mikroorganismen einen lebensfähigen, aber nicht kultivierbaren Zustand auslösen, der durch die Bebrütung in einem Wachstumsmedium allein nicht wiederhergestellt werden kann.
Wahrum Selektives Närhmedienwachstum + Atp-Test sind kein Schnelltest um Hefen von Bakterien zu unterscheiden?
Die schnelle selektive Atp-Biolumineszenz wird in der Lebensmittel- und Getränkeindustrie eingesetzt, um vor Ort schnell auf die Gefahr des Lebensmittelverderbs hinzuweisen, so dass der Hersteller sofortige Korrekturmaßnahmen ergreifen kann.
Aus diesem Grund ist die Bebrütung der Probe in selektiven Wachstumsmedien für 48 Stunden, um das Wachstum von Hefezellen zu erkennen, keine Lösung, da der Verderb in der Zwischenzeit weitergeht.
Außerdem benötigen viele wilde Hefen wie Brettanomyces und andere wilde Hefen 7 bis 10 Tage, um auf Agar-Platten zu wachsen.
Für einige Milchsäurebakterien gilt dies sogar noch mehr: Sie benötigen 7-10 Tage, um auf Selektivmedien zu wachsen.
Eine Herausforderung: Wie kan man Hefe-ATP von bakteriellem ATP unterscheiden?
Daher können ATP-Test, ob Atp-Biolumineszenzmethoden der 1., 2. oder 3. Generation, Hefen nicht von Bakterien unterscheiden, wenn Hefe-ATP zusammen mit bakteriellem ATP analysiert wird.
Wie oben gesehen, bilden Hefen sehr oft Cluster mit Bakterien, die sich nur sehr schwer, wenn überhaupt, durch Filtration oder Zentrifugation trennen lassen.
Dies ist einer der Gründe, warum diese klassischen Atp-Biolumineszenzmethoden in der Önologie nur zur Hygienekontrolle eingesetzt werden, da eine einzige Hefezelle so viel ATP enthält wie 100 lebensfähige Bakterienzellen.
Andererseits finden sich während der Weinalterung bedeutende Populationen von Milchsäurebakterien (10 exponentielle 7/ml). Diese Bakterien können die Biolumineszenz-Ergebnisse überlagern, so dass es unmöglich ist, die Anzahl der lebensfähigen Hefen in der Probe zu bestimmen.
Atp-Test der 4. Generation: schnelle Unterscheidung von Hefen und Bakterien.
Die selektive Atp-Biolumineszenz ermöglicht es, in einer gemischten Population von Mikroorganismen selektiv ATP von den Zielmikroorganismen nachzuweisen, ohne ATP von nicht zielgerichteten Mikroorganismen nachzuweisen.
Hier unten ist eine gemischte Population von Hefen und Bakterien vorhanden.
Eine Vorbehandlung zerstört die Hefen und eliminiert ihr ATP, dann setzen die verbleibenden Zielbakterien ihr ATP frei, und dieses bakterielle ATP wird durch Zugabe eines Luziferin-Luziferase-Komplexes nachgewiesen, der eine biolumiszente Lichtreaktion erzeugt.
Wenn Sie ein Beispiel für die selektive Atp-Biolumineszenz sehen möchten, klicken Sie auf diesen Link, um zu sehen, wie unser Brett Alert-Kit es ermöglicht, die vorherrschenden Brettanomyces bruxellensis-Hefen selektiv von Bakterien in Bodenweinfassproben zu unterscheiden.
