Qu'est-ce que l'Atpmétrie et la bioluminescence de l'ATP ?
L’Atpmétrie ou Atp-métrie quantifie l’ATP ou adénosine triphosphate par ajout de luciférine-luciférase, qui est un substrat-enzyme qui déclenche une réaction chimique de bioluminescence en présence d’ATP . Cette réaction de bioluminescence est mesurée par un luminomètre.
Cet ATP est produit uniquement par les cellules vivantes qu’elles soient d’origine végétale, microbienne, animale ou humaine,
Qu’est ce que l'ATP et l'ATPmétrie?
Toute levure ou bactérie viable produit de l’ATP (adénosine triphosphate). L’ATP est utilisé dans les cellules vivantes pour stocker l’énergie et pour les réactions biochimiques à l’intérieur de cette cellule afin pour la maintenir en vie. Lorsque les levures ou les bactéries sont mortes, elles ne produisent plus d’ATP,
Par conséquent on utilise la mesure l’ Atp ou adénosine triphosphate en microbiologie pour quantifier les micro-organismes viables, tel que la flore fongique ou les bactéries, pour les discriminer des microorganismes morts ou en contrôle d’hygiène de surface pour l’ATP total (libre et intracellulaire). Cette mesure de la quantité d’ATP s’appelle ATPmétrie ou ATP-métrie.
Comment l’ATP est-il analysé par Atpmétrie ?
La quantité d’ATP d’un échantillon pour estimer sa population microbienne est mesurée grâce à une réaction de bioluminescence que l’on provoque par l’ajout de réactifs en présence d’adénosine triphosphate.
D’abord est l’ATP libéré d’une cellule et mélangé à la luciférase qui est une enzyme qui combiné avec un substrat la luciférine produit une bioluminescence en présence d’ATP, Cette réaction de bioluminescence est la même que celle de la luciole (le ver luisant).
Comment la bioluminescence de l'ATP est-elle mesurée?
Pour quantifier cet ATP on utilise un bioluminomètre qui mesure l’intensité de la bioluminescence de l’ATP en présence de luciférine-luciférase. Cette mesure de bioluminescence s’affiche sur le bioluminomètre en URL (unités relative de lumière) ou en anglais “Relative Light Units” (RLU). Il existe différents types de bioluminomètres, certains moins sensibles que d’autres en raison de leur détecteur mais aussi de leurs consommables.
Une bioluminescence de l' ATP proportionnelle mais seulement en théorie...
- En théorie, plus la quantité d’ATP libéré est importante plus l’intensité de la bioluminescence l’est aussi, plus la population microbienne le serait.
Ceci n’est valable qu’en théorie seulement.
- de 1ère génération , définie comme “Atpmétrie qualitative” (analyse de l’atp total capturé sur un écouvillon ou dans un liquide dans une cuvette)
- ou de 2ème génération désignée “Atpmétrie quantitative” (filtration et extraction de l’Atp des cellules toutes confondues retenues sur filtre toupie)
se heurtent à des problèmes inextricables qui affectent l’analyse d’ATP.
Quels sont les obstacles de la mesure de l‘ATP classique n’arrive pas à résoudre?
Pourquoi l’Atpmétrie couramment utilisée est responsable de faux positifs et de faux négatifs?
Comment l’Atpmétrie sélective résoud ces problèmes?
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