L'ATP-métrie sélective rapide la réponse à une ATPmétrie non spécifique
L’impossibilité pour les méthodes classiques d’ATPmétrie de 1ère ou de 2ème génération de différencier les bactéries des levures, est un problème car l’ATP levurien va masquer l’ATP bactérien et vis-versa. Il est donc important de trouver une solution d’analyse de la bioluminescence l’ATP spécifique et rapide. C’est le rôle de l’ATPmétrie sélective rapide.
Qu'est-ce que l'ATP-métrie sélective rapide
L’ ATPmétrie sélective rapide analyse spécifiquement l’ATP de micro-organismes ciblés, sans analyser l’ATP des autres cellules non ciblées.
Cette analyse rapide et sélective de la bioluminescence de l’Adénosine triphosphate ne nécessite
- ni une longue incubation dans un milieu sélectif,
- ni une séparation physique souvent impossible par taille de cellule par filtration ou centrifugation.
L’analyse par bioluminescence d’Atp sélective rapide utilise le génie chimique de réactifs sélectifs pour détecter par bioluminescence en quelques minutes ou en quelque heures les micro-organismes ciblés.
Cette détection des microorganismes d’intérêt est discriminée des micro-organismes non ciblés dans un échantillon contenant à la fois des micro-organismes ciblés et non ciblés.
Ne confondons pas ATPmétrie sélective rapide avec ATPmétrie sélective.
Il est particulièrement trompeur pour les usagers de désigner un kit d’Atpmetrie comme étant un kit d’Atpmétrie sélective, un kit d’analyse de la Bioluminescence d’ATP qui ne fait qu’éliminer l’ATP libre pour ensuite extraire l’ATP de l’ensemble des cellules d’un échantillon sans aucune discrimination, pour analyser l’ATP total extrait de ces cellules. Cette analyse d’Atpmétrie n’est pas spécifique, c’est tout simplement un kit d’Atp-métrie de 2nde génération.
L’ Atpmétrie sélective et rapide ne nécessite pas de séparation physique, tel que la filtration ou la centrifugation. La filtration et la centrifugation ne peuvent séparer efficacement de nombreux micro-organismes les uns des autres.
Ces technologies de séparation donnent des résultats décevants lorsqu’on essaie de distinguer les micro-organismes en les séparant en fonction de leur taille pour les analyser ensuite par bioluminescence de l’ATP.
Voyons pourquoi, par exemple, les levures sont si difficiles à discriminer des bactéries lactiques par filtration ou centrifugation.
En outre, la bioluminescence Atp sélective rapide ne nécessite pas une croissance préalable du milieu pour être sélective. Voir ci-dessous pourquoi l’incubation sélective en milieu de croissance + bioluminescence Atp n’est pas une solution rapide pour la discrimination des levures par rapport aux bactéries ?
Pourquoi les levures ne peuvent être séparées de certaines bactéries?
Pourquoi les levures ne peuvent pas être séparées facilement des bactéries lactiques dans une matrice d’échantillon agro-alimentaire?
Comme le montre le cliché de gauche, les bactéries lactiques se fixent très souvent aux levures.
Les levures ne peuvent pas être facilement séparées de toutes les bactéries acétiques et lactiques. Car certaines cellules bactériennes adhèrent aux levures et forment des amas microbiens.
En raison de ce problème, la séparation physique des levures et des bactéries lactiques par filtration ou centrifugation dans une matrice de boisson réelle n’est ni faisable, ni réaliste.
Cela peut fonctionner si vous faites votre propre mélange de levures et de bactéries lactiques dans des conditions de laboratoire contrôlé et que vous le mélangiez dans une matrice de boisson, mais cela ne fonctionnera pas dans une situation réelle d’analyse d’échantillons de boissons contaminées par une flore d’altération.
De plus, l’ensemencement artificiel de bactéries lactiques ou de levures n’appartenant pas à la même matrice aliment-boisson est stressant pour ces souches et peut déclencher chez certains micro-organismes un état viable mais non cultivable (VNC), qui ne peut être ensuite récupéré uniquement par incubation dans un milieu sélectif.
Pourquoi coupler incubation dans un milieu sélectif + Atpmétrie n'est pas une solution rapide pour discriminer des levures des bactéries?
L’ Atpmétrie sélective rapide dans l’industrie alimentaire doit servir d’ outil d’alerte rapide sur site indiquant les risques d’altération des produits, afin que le producteur puisse prendre des mesures correctives immédiates, pour réduire la flore d’altération.
Pour cette raison, l’incubation d’un échantillon dans un milieu de croissance sélectif pendant 48 heures pour identifier ensuite par Atpmétrie la croissance de levures n’est pas une solution, car entre-temps, l’altération du produit continue et la flore d’altération augmente.
En outre, de nombreuses levures sauvages tel que Brettanomyces bruxellensis ont besoin de 7 à 10 jours pour se développer sur milieu de culture pour développer des colonies visibles.
C’est encore plus vrai pour certaines bactéries lactiques, qui ont besoin de 10 jours pour se développer sur des milieux sélectifs.
Kit d' ATPmétrie de 4ème génération: détection sélective des levures discriminée des bactéries lactiques/acétiques.
Principe de l'Atpmétrie sélective.
L’Atpmétrie Selective , permet de détecter selectivement l’ATP des microorganismes ciblés, sans détecter l’ATP d’autres microorganismes dans une population mélangée de différents microorganismes. Ci-dessus une population de levures et de bactéries est présente. Un traitement préliminaire permet de détruire les levures et d’éliminer leur ATP levurien. Reste alors la population bactérienne ciblées, dont on peut lyser les cellules et libérer leur ATP et le détecter par bioluminescence.
Un exemple d'Atpmétrie sélective rapide: la détection des Bretts dans le vin
Si vous voulez en savoir comment notre kit Brett Alert permet de discriminer sélectivement les levures Brettanomyces bruxellensis des bactéries dans des échantillons de vin prélevé en fond de barriques d’élevage ou de cuve cliquez sur ce lien.
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