ATPmetría selectiva rápida: la respuesta a la ATP-metría no específica.
La imposibilidad de que los métodos clásicos de ATPmetría de primera o segunda generación diferencien las bacterias de las levaduras es un problema porque el ATP de las levaduras enmascarará el ATP bacteriano y viceversa. Por lo tanto, es importante encontrar una solución para el análisis de la bioluminiscencia específica y rápida del ATP. Esta es la función de la ATPmetría selectiva rápida.
¿Qué es la ATPmetría selectiva rápida?
La ATPmetría selectiva rápida analiza específicamente el ATP de los microorganismos objetivo, sin analizar el ATP de otras células no objetivo.
Este análisis rápido y selectivo de la bioluminiscencia del trifosfato de adenosina no requiere
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- ni una incubación larga en un medio selectivo,
- ni una separación física a menudo imposible por el tamaño de las células por filtración o centrifugación.
El análisis rápido y selectivo por bioluminiscencia del Atp utiliza la ingeniería química de reactivos selectivos para detectar por bioluminiscencia los microorganismos objetivo en cuestión de minutos u horas.
Esta detección de microorganismos de interés se discrimina de los microorganismos no objetivo en una muestra que contiene tanto microorganismos objetivo como no objetivo.
No confunda la ATPmetría selectiva rápida con la ATPmetría selectiva.
Es especialmente engañoso para los usuarios referirse a un kit de Atpmetría como un kit de Atpmetría selectiva, un kit de análisis de bioluminiscencia de ATP que sólo elimina el ATP libre y luego extrae el ATP de todas las células de una muestra sin ninguna discriminación, para analizar el ATP total extraído de esas células. Este análisis de Atpmetría no es específico, es simplemente un kit de Atp-metría de segunda generación.
La atpmetría selectiva y rápida no requiere una separación física, como la filtración o la centrifugación. La filtración y la centrifugación no pueden separar eficazmente muchos microorganismos entre sí.
Estas tecnologías de separación dan resultados decepcionantes cuando se intenta distinguir los microorganismos separándolos según su tamaño y analizándolos después por bioluminiscencia ATP.
Veamos por qué, por ejemplo, la levadura es tan difícil de discriminar de las bacterias lácticas por filtración o centrifugación.
Además, la bioluminiscencia del Atp selectiva rápida no requiere un medio de crecimiento previo para ser selectiva.
Vea a continuación por qué la incubación selectiva en medio de crecimiento + bioluminiscencia Atp no es una solución rápida para discriminar las levaduras de las bacterias.
¿Por qué no se puede separar la levadura de algunas bacterias?
¿Por qué no se pueden separar fácilmente las levaduras de las bacterias lácticas en una matriz de muestras alimentarias?
Como muestra la imagen de la izquierda, las bacterias lácticas se adhieren muy a menudo a la levadura.
La levadura no puede separarse fácilmente de todas las bacterias acéticas y lácticas. Esto se debe a que algunas células bacterianas se adhieren a la levadura y forman grupos microbianos.
Debido a este problema, la separación física de la levadura y las bacterias lácticas por filtración o centrifugación en una matriz de bebida real no es factible ni realista.
Puede que funcione si usted fabrica su propia mezcla de levadura y bacterias lácticas en condiciones controladas de laboratorio y la mezcla en una matriz de bebidas, pero no funcionará en una situación real de análisis de muestras de bebidas contaminadas con flora alterante.
Además, la siembra artificial de bacterias lácticas o levaduras que no pertenecen a la misma matriz de alimentos y bebidas es estresante para estas cepas y puede desencadenar un estado viable pero no cultivable (VNC) en algunos microorganismos, que sólo pueden recuperarse mediante la incubación en un medio selectivo.
¿Por qué la incubación en un medio selectivo + Atpmetría no es una solución rápida para discriminar las levaduras de las bacterias?
La atpmetría selectiva rápida en la industria alimentaria debe servir como herramienta de alerta temprana in situ que indique el riesgo de deterioro de los productos, de modo que el productor pueda tomar medidas correctivas inmediatas para reducir la flora de deterioro.
Por esta razón, incubar una muestra en un medio de crecimiento selectivo durante 48 horas y luego identificar el crecimiento de la levadura por Atpmetría no es una solución, ya que mientras tanto el deterioro del producto continúa y la flora de deterioro aumenta.
Además, muchas levaduras silvestres, como Brettanomyces bruxellensis, necesitan de 7 a 10 días para crecer en medios de cultivo y desarrollar colonias visibles.
Esto es aún más cierto para algunas bacterias lácticas, que necesitan 10 días para crecer en medios selectivos.
Kit de ATPmetría de 4ª generación: detección selectiva de levaduras discriminadas de las bacterias lácticas/acéticas.
Principio de atpmetría selectiva.
La Atpmetría selectiva, permite la detección selectiva del ATP de los microorganismos objetivo, sin detectar el ATP de otros microorganismos en una población mixta de diferentes microorganismos. Por encima de una población de levaduras y bacterias está presente. Un tratamiento preliminar destruye la levadura y elimina su ATP. Esto deja a la población bacteriana objetivo, cuyas células pueden ser lisadas y su ATP liberado y detectado por bioluminiscencia.
Un ejemplo de atpmetría selectiva rápida: la detección de Bretts en el vino.
Si desea saber cómo nuestro kit Brett Alert puede discriminar selectivamente las levaduras Brettanomyces bruxellensis de las bacterias en muestras de vino tomadas del fondo de las barricas o cubas, haga clic en este enlace.